تكنيك هاي مولكولي

[نگار]

نميدونم كدوم گرايش زيست رو ميخونيد يا خوندين حتي به نظرم تكنيك هاي مولكولي واقعا جالبن
كلاسي توي دانشگاهمون داره برگزار ميشه من سعي مي كنم تيكه هاي ازش رو براتون بذارم اين تكنيكا ب طور كلي شامل چهار تا سر فصله
استخراج dna rna protein
تخليص شون
الكتروفورز
بيو انفوزماتيك و من يه موردم يادم رفته
ميخوام هركي هرچيزي كه ميدونه از كاربرداي اين چهار تا رو با هم ب اشتراك بذاريم
پيشاپيش ميتونم بگم من ب شخصه عاشق اين تاپيكممم

 

[riant]

سلام
چی شد پس؟ بی صبرانه منتظر معرفی کتاب و منبع هستیم

 

[نگار]

سلام
چی شد پس؟ بی صبرانه منتظر معرفی کتاب و منبع هستیم

سلااام من نیز بی صبرانه منتظر تابستونم
اگه بیوفیزیکمو خوب بدم جزوه pcr رو اپلود میکنم وگرنه میشینم یه گوشه اه و پشیمانی

اهان بچه ها slide share
و coursera رو میشناسین؟
کسی تجربه استفاده رو داره بگه
من سرچ کردم دیدم اینایی ک ما کلی پول کلاس میدیم تو یوتیوب ریخته

 

[نگار]

مدرکش(سرتیفیکیت) پولیه

خب حالا مگه اين سرتيفيكيت فايده هم دارن؟

 

[riant]

سلااام من نیز بی صبرانه منتظر تابستونم
اگه بیوفیزیکمو خوب بدم جزوه pcr رو اپلود میکنم وگرنه میشینم یه گوشه اه و پشیمانی

اهان بچه ها slide share
و coursera رو میشناسین؟
کسی تجربه استفاده رو داره بگه
من سرچ کردم دیدم اینایی ک ما کلی پول کلاس میدیم تو یوتیوب ریخته

حالا از چیزای ناآشتا تر از پی سی آرم اگه داشتی بزار
اینا چی ان؟

 

[نگار]

حالا از چیزای ناآشتا تر از پی سی آرم اگه داشتی بزار
اینا چی ان؟

سایت و اپلیکیشن اموزشی
اهم اهم
ن جدی خب چیا رو اینجا با هم یاد بگیریم خوبه اخه عنوان تاپیک تکنیک مولکولیه من دقیق نمیدونم چیا خوبه بلد باشیم؟
مثلا الان طراحی پرایمر خیلی خوبه اگه بشه تا یه حدی این جا به هم دیگه کمک کرد یه ذره بلد شد به نظر من البته نظر شخصیمه

 

[riant]

سایت و اپلیکیشن اموزشی
اهم اهم
ن جدی خب چیا رو اینجا با هم یاد بگیریم خوبه اخه عنوان تاپیک تکنیک مولکولیه من دقیق نمیدونم چیا خوبه بلد باشیم؟
مثلا الان طراحی پرایمر خیلی خوبه اگه بشه تا یه حدی این جا به هم دیگه کمک کرد یه ذره بلد شد به نظر من البته نظر شخصیمه

همه ی چیزایی که توی پست اول گفتی
و چیزای دیگه
از استخراج شرو کنیم ترجبحا

 

[پرواز]

اهم اهم!
با طراحی پرایمر شروع کنم!
اصی این پرایمر چیه؟توالی نوکلئوتیدی کوتاهی(۱۸تا۲۲نوکلوتید دارد) که باهاش همانند سازی آغاز میشه برای هر همانند سازی دوتا پرایمر لازم داریم.(forward و reverse)
یه جورایی مثل قرص ماستِ یه تیکه حاضر شده بقیهش با همون میسازن
حالا چه مدلیِ طراحیش؟
چند تا سایت و آپ داره
Primer3Plus
PrimerQuest
ePrime
Beacon Designer
Ncbi
شما طراحی می کنید طرحتون شرکت های بیرون میسازند یا خودتون میسازین
هرکدوم از این سایت ها کلی ریزه کاری داره که در ادامه یا خودم میگم یا اگه بلدین بگین خیلی خوب میشه.
*ساده ترین روش با سایتncbi

 

[پرواز]

چند تا کیت جالب امروز دیدم گفتم معرفی کنم. بعد امتحانا ایشالله طراحی پرایمر میگم
۱ کیت تعیین طرح واره و هویت مولکولی برای دنای آسیب دیده
کاربردش مثلا تعیین هویت شهدا
۲ کیت ™KBC IRFiling
در ژنتیک قانونی، تعیین هویت انسانی، تعیین روابط خویشاوندی، تحقیقات جنایی، آزمایش پدر- فرزندی، تعیین هویت انسان در حوادث و غیره کاربرد دارد.
۳کیت تعیین قرابت ذکوری به منظور تعیین هویت
۱- تعیین هویت و ژنتیک قانونی در مورادی مانند تجاوز که DNA مرد در حضور مقدار زیادی از DNA زن وجود دارد.

۲- تعیین رابطه خویشاوندی میان دو فرد مذکر به خصوص هنگامی‌که نمونه مادر وجود ندارد.

۳- بررسی افراد گمشده هنگامی‌که فقط خویشاوندان مرد در دسترس هستند.

۴- تست‌های مربوط به تعیین والدین، پاسخ به سوالهای تاریخی، فراهم آوردن اطلاعات برای تحقیق در مورد شجره نامه‌ها نیز کاربرد دارد.

 

[پرواز]

منُ ببخشید که پراکنده میگم
الایزا یه تکنیک سنجش مولکولی هست اینجا اول میگه کلا سنجش های ایمنی چیه؟
سنجش ایمنی۱
سنجش ایمنی۲
شرح تکنیک الایزا (عاشق اینم بگم الایژا)
سنجش جذب ایمنی وابسته به آنزیم (ELIZA, assay immunoabsorbance linked Enzyme(
مقدمه
آزمون هاي سرولوژیک به دو دسته آزمون هاي ایمنوفلئورسنت (IF نشان دارکردن با مواد فلورسنت و
آزمون هاي غیر ایمنو فلئورسنت (IF Non نشان دارکردن با آنزیم و مواد رادیواکتیو تقسیم میشوند. تست
الایزا که در حالت معمول براي ردیابی آنتی ژن یا آنتی بادي به کار میرود از جمله آزمون هاي غیر ایمنو
فلئورسنت است. بدین ترتیب که یکی از این دو ماده در بستر جامد ثابت میشود و دومی براي ردیابی بهکار
گرفته میشود، اما اساساً براي ردیابی هرجفت ماده اي که مثل جفت آنتی ژن و آنتی بادي به هم گرایش
داشته و قدرت اتصال مناسبی نسبت به هم دارند میتواند بهکار گرفته شود (مثلا لکتین به لیگاند مربوطه
اش یا مولکول به گیرنده اختصاصی اش) البته این پدیده یعنی اتصال بین دو ماده اي که آنتی بادي و آنتی
ژن نیستند اما گرایش به هم دارند اغلب اوقات مشکل آفرین است و براي بالا بردن حساسیت و اختصاصیت
اتصال بین آنتی بادي وآنتی ژن در الایزا باید این اتصالات ناخواسته را به طریقی مهار کرده ویا کارهاي
جبرانی لازم را در نظر گرفت.
ELISA روش بسیار حساسی است. تحت شرایط تنظیم شده (ازنظر غلظت یونی و pH (پروتئینها (آنتی
ژن یا آنتی بادي) بهطور خود به خود تمایل دارند که به بستر جامد متصل شوند. ماهیت این اتصال به خوبی
معلوم نشده است اما برگشت پذیر بوده و با استفاده از pH هاي بالاتر یا پایین تر و استفاده از غلظت هاي
یونی بالا اتصال قطع میشود. این نوع اتصال خود به خودي اگرچه ظرفیت محدودي دارد ولی با به کار گیري
سیستم هاي تقویتی مناسبی مثل سیستم آنزیم ـ سوبسترا این اتصالات وسیله بسیار خوبی براي طراحی
سیستم الایزا گردیده است.

جعبه متن مخفی: نمونه کار

انواع الایزا
مستقیم: آنتی بادي نشاندار مستقیماً به آنتی ژن متصل میشود.
غیر مستقیم: آنتی آنتی بادي نشاندار به آنتی ژن متصل میشوند.
ساندویچی: آنتی بادي به آنتی ژن و آنتی ژن به آنتی بادي نشاندار متصل میشود.
مواد و وسایل
1 -سمپلر
2 -ویال و سرسمپلر
3 -بافر شستشو (BUF WASH ،(محلول کنژوگه (CONJ ،(کنترل مثبت (+ CONTROL ،(کنترل
سولفوریک منفی (– CONTROL ،(سوبسترا (SUBS ،(محلول رقیق سازي (DILSPE ،(محلول کالیبراتور، اسید
4 -دستگاه خوانش الایزا (reader ELISA(
5 -پلیت 96 خانهاي
روش کار
در این آزمایش از کیت الایزاي تشخیص IgM علیه ویروس استفاده شد.
1 -نمونه به نسبت 100/1 رقیق میشود. 10 میکرولیتر از نمونه به 1 میلی لیتر رقیق کننده اضافه میشود.
سپس به آرامی با ورتکس مخلوط میشود.
2 -نمونه رقیق شده در چاهک هاي صفحه میکرو پلیت ریخته میشود و چاهک شماره 1 براي آزمایش
بلانک خالی گذاشته میشود.
3 -100 میکرولیتر + Ctrl در سه تکرار و 100 میکرولیتر - Ctrl در یک تکرار و 100 میکرولیتر کالیبراتور
در چاهک هاي صفحه میکروپلیت ریخته میشود.
4 -100 میکرولیتر نمونه رقیق شده در ویال مورد نظر ریخته میشود و در دماي 37 درجه سانتی گراد به
مدت 60 دقیقه انکوبه میشود.
5 -100 میکرولیتر مخلوط آنتی ژن آنتی بادي به هرچاهک اضافه میشود به جز چاهک بلانک، و با درپوش
درب چاهک ها پوشیده میشود.
6 -میکروپلیت در دماي 37 درجه سانتی گراد بمدت 60 دقیقه قرار داده میشود سپس به خوبی شسته
میشود.
7 -100 میکرولیتر سوبستراي رنگ ساز به هرچاهک اضافه میشود و به خوبی مخلوط میشود. سپس
میکروپلیت ها به مدت 20 دقیقه دردماي 24 -18 درجه سانتیگراد نگهداري میشود.
8 -100 میکرولیتر اسیدسولفوریک به هرچاهک اضافه میشود تا واکنش آنزیم متوقف شود و درنهایت جذب
هر چاهک در دستگاه الایزا دیده و خوانده میشود.
نتایج
نمونه مورد آزمایش جذب 43/0 داشت که لازم است با منحنی استاندارد جهت تعیین میزان آنتی بادي
مقایسه شود.

الایزا ساندویچی یا غیر رقابتی
فوت کوزه گری۱ زاویه سمپلر با میکروتیوب باید ۶۰ درجه باشه.
فوت کوزه گری ۲
اگر فرصت شد فیلمای خودمون توی آزمایشگاهم میزارم براتون

 

[پرواز]

طراحی پرایمر با سایت ncbi
https://histogene.ir/educational-video-molecular-biology/
مشکلی بود بگین تا رفع کنم.

 

[MarMari]

خب حالا مگه اين سرتيفيكيت فايده هم دارن؟

بله. سرتيفيكيت هاي كورسرا بسيار معتبرن. شما در واقع داريد از بهترين دانشگاه هاي جهان از اين طريق مدرك ميگيريد كه بين المللي هستند و براي اون افرادي كه ميخوان مهاجرت تحصيلي كنن به عنوان رزومه مناسبه.